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NK細胞活化擴增方法,Corning版

更新時間:2018-02-08 點擊次數(shù):2421

NK 細胞活化

  1.  熱滅活自體血漿,56°C,30min。離心, 800 xg , 20 min,去除沉淀。4°C 保存上清血漿,培養(yǎng)備用。
  2.  至少5倍體積的PBS(不含鈣鎂)清洗PBMCs。室溫離心500xg,10min,收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL,使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
  3. 預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶使用前,用PBS(不含鈣鎂)清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶,37°C,5% CO2培養(yǎng)。

注意:第六天之前,如果培養(yǎng)基變黃,細胞密度超過2.0 x 106 cells/mL需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿,保持細胞密度在在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。

NK細胞擴增

  1.  培養(yǎng)第六天,培養(yǎng)液離心,適量NK擴增培養(yǎng)基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)重懸細胞,再轉(zhuǎn)移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細胞培養(yǎng)袋。
  2. 每隔兩三天,根據(jù)細胞擴增狀態(tài),培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴增培養(yǎng)基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)保持細胞密度在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。
  3.  細胞總量到達2 x 109 收獲細胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。

注意:整個實驗過程中,細胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔,以避免細胞損傷,保持細胞活性。

 

Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝

英文名:Corning® NK Expansion Kit

中文名:Corning® NK細胞活化/擴增培養(yǎng)套裝

 

應(yīng)用:NK細胞活化擴增

品牌產(chǎn)地:美國Corning

保存:2°C - 8°C

 

NK細胞是當(dāng)今免疫治療常用的細胞。但是NK細胞培養(yǎng)操作難度大,對培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術(shù)要求很高,難以獲得高純度能的活性細胞。 Corning NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝由多個組分組成,為 NK細胞培養(yǎng)提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數(shù)量產(chǎn)量高,活性高,具有很高的殺傷效應(yīng)。

產(chǎn)品組成

NK細胞活化培養(yǎng)基

NK細胞活化添加劑

NK細胞擴增培養(yǎng)基

抗體預(yù)包被T75細胞培養(yǎng)瓶

細胞培養(yǎng)袋

 

產(chǎn)品特色

擴增能力強,在14天內(nèi)可達到100倍擴增

效應(yīng)細胞比例高,可達80%

操作方便

 

產(chǎn)品訂購信息

 

品牌

貨號

產(chǎn)品描述

包裝

Corning

88-570-kit

NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells

NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝

1Kit

套裝包含

活化用

Pre-coated T-75 flask 抗體預(yù)包被T75細胞培養(yǎng)瓶

1瓶

NK primary medium NK細胞活化培養(yǎng)基

1×50 mL

NK primary supplement NK細胞活化添加劑

1×1.8 mL

擴增用

Expansion medium NK細胞擴增培養(yǎng)基

1×1000 mL

配件

細胞培養(yǎng)袋

1 x 640 cm2

 

 

 

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