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ELISA試劑盒測(cè)定具體的做法

更新時(shí)間:2022-07-15 點(diǎn)擊次數(shù):1237
我們建議在臨床ELISA試劑盒測(cè)定中盡量使用較低溫育溫度較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件。將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí),孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時(shí)間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時(shí)間可能還比較長(zhǎng),而在臨床實(shí)驗(yàn)室中,ELISA試劑盒很少有人注意這個(gè)問(wèn)題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計(jì)時(shí),這樣就很容易造成實(shí)際測(cè)定中溫育時(shí)間不夠,弱陽(yáng)性樣本測(cè)不出來(lái)的問(wèn)題。  
曾有一地處南方的血站同行提出了一個(gè)問(wèn)題,就是在每一年的冬季總有那么一個(gè)多月的時(shí)間,ELISA試劑盒在做HBsAg測(cè)定的室內(nèi)質(zhì)控中,ELISA試劑盒測(cè)定由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)的1ng/ml弱陽(yáng)性樣本時(shí),總是測(cè)不出來(lái),不知原因?yàn)楹?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時(shí)微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時(shí)間不夠,以致弱陽(yáng)性樣本測(cè)定為陰性。  
因此,為保證37℃下足夠的溫育時(shí)間,臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長(zhǎng)時(shí)間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃,從而適當(dāng)延長(zhǎng)板條在溫箱中的放置時(shí)間。用一小溫度計(jì)放置板孔反應(yīng)溶液中測(cè)量觀察即可。ELISA試劑盒作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。

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