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小腸類器官原代培養(yǎng)全流程

更新時間:2024-01-03 點擊次數(shù):823

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類器官原代培養(yǎng)全流程

實驗前準備

CO2 培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺、倒置顯微鏡、臺式冷凍離心機、水浴鍋、水浴搖床,醫(yī)用冰箱、-80°冰箱、移液器(一套)、眼科剪、眼科鑷。

試劑:小腸類器官培養(yǎng)基,小腸類器官消化液,小腸組織保存液,小腸類器官緩沖液,硫酸慶大霉素,雙抗,組織固定液,基質(zhì)膠,60mm細胞培養(yǎng)皿, 100μm濾篩,15ml離心管,1.5ml EP管若干,4度冰盒,眼科剪刀,眼科鑷。

實驗流程

(1)樣本準備:

將組織放入含有器官保存液的取樣瓶中,4℃從醫(yī)院/實驗室取回。
將取樣瓶消毒,組織取出放入培養(yǎng)皿樣本拍照,并登記,大小,顏色,軟硬程度,組織類型等信息。
(2)清洗,剪碎:
添加含有雙抗、慶大霉素的類器官緩沖液浸泡,用眼科鑷刮去腸道粘膜,腸絨毛等。在培養(yǎng)皿中用類器官緩沖液清洗三次(每次更換培養(yǎng)皿)后剪碎,剪成大約1mm3的組織塊。靜置2次。
(3)消化-過濾:

用組織消化液在37℃進行消化10-15min(消化過程中隨時觀察消化情況)。

類器官緩沖液終止消化,用槍頭輕柔吹打可以看到液體變渾濁。

使用100μm孔徑的篩網(wǎng)進行過濾,取少量濾液在鏡下進行觀察,可以看到明顯的隱窩狀組織結(jié)構(gòu)。

4)離心、加膠

(5)鋪板

(6)觀察


歐瑪生物類器官培養(yǎng)基系列,華雅均有現(xiàn)貨,歡迎咨詢

產(chǎn)品                貨號       名稱(英文)

結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基 OM11 (Human) Colorectal Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人結(jié)腸類器官培養(yǎng)基    OM11N (Human) Colorectal Organoid Culture Medium 100ml

胃癌類器官培養(yǎng)基    OM12 (Human) Gastric Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人胃類器官培養(yǎng)基    OM12N (Human) Gastric Organoid Culture Medium 100ml

肺癌類器官培養(yǎng)基    OM13 (Human) Lung Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人肺類器官培養(yǎng)基    OM13N (Human) Lung Organoid Culture Medium 100ml

人胰腺癌類器官培養(yǎng)基 OM14 (Human) Pancreatic Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人胰腺類器官培養(yǎng)基    OM14N (Human) Pancreatic  Organoid Culture Medium 100ml

肝癌類器官培養(yǎng)基    OM15 (Human) Liver Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人肝臟類器官培養(yǎng)基    OM15N (Human) Liver Organoid Culture Medium 100ml

宮頸癌類器官培養(yǎng)基    OM16 (Human) Cervical Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人宮頸類器官培養(yǎng)基    OM16N (Human) Cervical Organoid Culture Medium 100ml

食管鱗癌類器官培養(yǎng)基 OM17 (Human) Esophageal Squamous Cancer Organoid Culture Medium 100ml

乳腺癌類器官培養(yǎng)基    OM18 (Human) Breast Cancer Organoid Culture Medium 100ml

膀胱癌類器官培養(yǎng)基    OM19 (Human) Bladder Cancer Organoid Culture Medium 100ml

小鼠小腸類器官培養(yǎng)基 OM31 (Mouse) Small Intestinal Organoid Culture Medium 100ml

小鼠大腸類器官培養(yǎng)基 OM32 (Mouse)  Large Intestinal Organoid Culture Medium 100ml

小鼠肝臟類器官培養(yǎng)基 OM33 (Mouse) Liver Organoid Culture Medium 100ml

小鼠胃類器官培養(yǎng)基    OM34 (Mouse) Gastric Organoid Culture Medium 100ml

小鼠肺類器官培養(yǎng)基    OM35 (Mouse) Lung Organoid Culture Medium 100ml

小鼠子宮類器官培養(yǎng)基 OM36 (Mouse) Uterine Organoid Culture Medium 100ml

小鼠胰腺類器官培養(yǎng)基 OM37 (Mouse) Pancreatic Organoid Culture Medium 100ml

小鼠食管類器官培養(yǎng)基 OM38 (Mouse) Esophageal Organoid Culture Medium 100ml

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